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  1. 医歯学総合研究科
  2. 医歯学総合研究科・科研費報告

Transwellを利用した極性をもつ網膜色素上皮細胞の培養法の確立

http://hdl.handle.net/10232/14795
http://hdl.handle.net/10232/14795
68032d41-b175-4f7f-b11b-764059ed026f
名前 / ファイル ライセンス アクション
22791674seika.pdf 22791674seika.pdf (307.5 kB)
Item type 研究報告書 / Research Paper(1)
公開日 2014-12-24
タイトル
タイトル Transwellを利用した極性をもつ網膜色素上皮細胞の培養法の確立
タイトル言語 ja
タイトル
タイトル Assay for establishment of highly polarized retinal pigment epithelial cells
タイトル言語 en
著者 園田, 祥三

× 園田, 祥三

WEKO 39132
NRID 1000020325806

ja 園田, 祥三

en SONODA, Shozo

Search repository
言語
言語 jpn
キーワード
主題言語 ja
主題Scheme Other
主題 細胞・組織
キーワード
主題言語 en
主題Scheme Other
主題 polarized cell
キーワード
主題言語 ja
主題Scheme Other
主題 網膜色素上皮
キーワード
主題言語 ja
主題Scheme Other
主題 加齢黄斑変性
資源タイプ
資源タイプ識別子 http://purl.org/coar/resource_type/c_18ws
資源タイプ research report
アクセス権
アクセス権 open access
アクセス権URI http://purl.org/coar/access_right/c_abf2
要約
内容記述タイプ Other
内容記述 2010-2011年度科学研究費助成事業(科学研究費補助金(若手研究(B)))研究成果報告書 課題番号:22791674 研究代表者:園田祥三 (鹿児島大学大学院医歯学総合研究科助教)
内容記述言語 ja
要約
内容記述タイプ Other
内容記述 近年、Transwellを利用した網膜色素上皮細胞 (RPE)培養によって、細胞極性を示すRPE (polarized RPE) 培養が可能になっている。我々は、さらに培養法を改良し、ヒトおよびブタRPEで、細胞極性が高くより分化した培養法を確立した。極性RPEの特徴は、形態的には細胞表面に微絨毛がよく発達、tight junction, adherence junctionがよく発達し形態的に生体RPEときわめて類似。機能的には、trans epithelial resisatance (TER)値がブタで200Ω・cm2 以上)、permeability assayで自由な物質の透過が制御、さらにVEGFやPEDFの極性分泌が生体と同じであることを確認した。
内容記述言語 ja
要約
内容記述タイプ Other
内容記述 Our group attempted to establish a reproducible method for culturing highly polarized RPE and tried to elucidate the pathophysiological mechanism of retinal disease using polarized culture RPE.
Highly polarized RPE cells were grown on Transwell^{TM} filters (12 mm, i.d). Primary cultures of RPE cells on T75 flask were seeded on fibronectin-coated Transwell^{TM}. RPE cells were cultured in 1% FBS for more than 4 weeks. As in native tissue, porcine RPE cells formed a monolayer, were well pigmented, and were arranged in a regular hexagonal array. The integrity of RPE layer was confirmed by expression of TJ proteins ZO-1 and occluding and well developed microvilli, localization of pigment on the apical side, nuclei on basal side, and presence of tight‐junctional complexes by electron microscopy. Well-differentiated RPE cells secreted VEGF-A preferentially to the basolateral side of the tissue. With respect to application of polarized culture RPE system, after stimulation with TNF-a, TER decreased about 15% of reduction in comparison to control at 24 hours, which was abolished by anti-TNF-a antibody. This reduction was inhibited by SB203580 inhibitor, but not by any other inhibitors.
内容記述言語 en
作成日
日付 2012-04-02
日付タイプ Collected
出版タイプ
出版タイプ VoR
出版タイプResource http://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85
NDC
主題Scheme NDC
主題 496
公開者・出版者
出版者 鹿児島大学
出版者言語 ja
公開者・出版者
出版者 Kagoshima University
出版者言語 en
科研費番号
科研費番号 22791674
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Ver.1 2023-07-25 13:53:55.840729
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